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人丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒

更新时间:2024-06-01 10:15:42 [举报]


人丝裂原蛋白激酶蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒



 



人丝裂原蛋白激酶蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒



自从Engvall和Perlman(1971)报道建立酶联吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以来,由于ELISA具有快速、、简便、易于化等优点,使其迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验,都大大了ELISA的特,加之电脑化程度的ELISA检测仪的使用,使ELISA更为简便实用和化,从而使其成为广泛应用的检测之一。如今ELISA已被广泛应用于多种和等的诊断。在动物检疫方面,ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的。






操作注意事项



1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。



2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。



3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。



4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。



5. 所有组分使用充分摇匀。



6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。



7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。



8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。



 






操作步骤 1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。 2. 设置品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同浓度的品 50μL; 3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL; 4. 随后品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。 5. 弃去,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 结果判断 绘制曲线:在Excel工作表中,以品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。






 



免责声明



试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。 严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。



 人丝裂原蛋白激酶蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒



标记:良好的酶结合物取决于两个条件:即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要,因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中,的活性有所,故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的,可性,而且可稀释使用,非特吸附。






 

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