影响ELISA试剂盒实验的因素
一、试剂盒
1、抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活，结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高，对杂质的反应灵敏度也高，实验中空白对照OD值偏高或假阳性;
2、酶结合物浓度过高，也会导致OD值假性增高。
二、试验仪器
1、ELISA试剂盒加样器是否经过校正，酶免测定血清用血量很少，如手工加样器的性能不好，吸取样品不，会使结果忽高忽低;
2、每次洗板前，应检查洗板机针孔有无堵塞。
三、操作
1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用，试剂用完及时放回冰箱冷藏，以免造成试验结果假性降低;
2、加样时注意勿触及包被板底部，以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性;
3、洗涤不充分，会使结果假性增高，过分洗涤呈假阴性;
4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬季板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色，水汽或孔内气泡也会使OD值升高;
5、抗原与抗体反应达到完全平衡，依赖于温度与时间。温度45℃易引起失活及标记物脱落，温度低于4℃，影响反应速度。
ELISA试剂盒的特点：
1、采用全进口原料和抗体-、灵敏、特异，严格运用国际生产标准进行 批量生产;
2、规范包被操作-吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高;
3、的优化方案-重复性高，可靠性强;
4、购买本公司的ELISA试剂盒，免费代测;
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6、技术服务：，及时，耐心;
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本;
8、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡 、虾、鱼等;
9、可检测指标：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长 因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等;
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酶联吸附测定原理
ELISA遵守以下3个核心原理：1)抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并保持其学活性;2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其学和酶学活性;3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。在ELISA中酶起到很关键的作用，常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多。酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物,它不仅具有抗体抗原特异的反应，还能催化酶促反应，显示出生物放大作用。
